Inducción de tolerancia en modelo de autotrasplante / Induction of tolerance in allogeneic transplant model

Introduction: Vascularized composite allotransplantation (VCA) involves the transplantation of complex anatomical structures including different kinds of tissue. The aim was to study the effect of a treatment with immature dendritic cells in a model of VCA. Materials and Methods: The rat hind limb allotransplantation model was used. Due to the high antigenic mistmatch Brown Norway rats were used as donors and Lewis rats as recipients. The bone marrow derived immature dendritic cells were cultured under GM-CSF stimuli and donor tissue. The rejection grade and the survival of the graft were assessed. Experimental groups: group I (n = 3): no treatment; Group II (n = 6): tacrolimus 10 mg/kg one day before the transplantation (day -1); Group III (n = 3): tacrolimus 10 mg/kg on day -1 and 6 mg/kg from day 0 to 14, plus intravenous saline infusion on days 7 and 14; Group IV (n = 3): tacrolimus 10 mg/kg on day -1 and 6 mg/kg from day 0 to 14, plus intravenous immature dendritic cells on days 7 and 14. Results: All 15 allografts developed rejection. The mean allograft survival was 14 days in group I, 15 days in group II, 34 days in group III and 58 days in groups IV (p < 0.05). Conclusions: In the rat hind limb allotransplantation model under tacrolimus monotherapy, the treatment with immature bone marrow derived dendritic cells pulsed with alloantigens increases the survival of the graft.

Introducción: El alotrasplante compuesto vascularizado (ACV) involucra el trasplante de estructuras anatómicas complejas que pueden contener distintos tipos de tejidos. El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto del tratamiento con células dendríticas inmaduras derivadas de médula ósea del receptor y cargadas con aloantígenos como potencial inductor de tolerancia en un modelo de ACV. Animales y Métodos: Para realizar el modelo de alotrasplante de extremidad posterior de la rata, se utilizaron como donantes ratas Brown Norway y como receptoras ratas Lewis. Las células dendríticas se diferenciaron a partir de precursores de médula ósea que se cargaron con lisado de tejido del donante. Grupos experimentales: Grupo I (n = 3): sin tratamiento; Grupo II (n = 6): tacrolimus 10 mg/kg vía oral el día previo al trasplante (día -1); Grupo III (n = 3): tacrolimus 10 mg/kg el día -1 y 6 mg/kg desde el día 0 al 14 post operatorio como mantención; Grupo IV (n = 3): mismo esquema de tacrolimus que grupo III, pero además infusión intravenosa de células dendríticas los días 7 y 14. Se evaluó la sobrevida de los implantes y el grado de rechazo. Resultados: Los 15 animales trasplantados presentaron rechazo. La sobrevida media del ACV fue de 14 días en el grupo I, 15 días en el grupo II, 34 días en el grupo III y 58 días en el grupo IV (p < 0,05). Conclusión: En un modelo de ACV bajo tratamiento con tacrolimus, la infusión de células dendríticas inmaduras derivadas de médula ósea y pulsadas con aloantígeno aumentan la sobrevida del implante.

Colgajos en reconstrucción de la región calcánea lateral / Flaps in reconstruction of the lateral calcaneal region: case series and treatment algorithm for soft-tissue complications of the lateral approach for calcaneal fractures

Introduction: Calcaneal fractures are the most frequent tarsal bone fracture. A high complication rate has been reported for the L-shaped lateral calcaneus surgical approach. Coverage of the resulting defect can be challenging. The aim of this article is to report a case series and propose a new treatment algorithm. Materials and Methods: Between January 2011 and December 2013 ninety-five patients underwent a close calcaneus fracture surgery by lateral approach. Ten patients suffered from surgical wound complications. Defects were classified as small (< 2 cm), medium (2-5 cm) or big size (> 5 cm). Results: Small size defects were covered with local fasciocutaneous advancement and rotation flaps. Medium size defect were covered either with a distally based sural neurocutaneous flap or propeller flap based on peroneal artery perforators. A free flap was used in the big size defect presented. Mean follow-up was 16 month (range 5-41 month). Stable coverage was achieved in all cases and no revision surgery was needed. Conclusions: Soft-tissue complications associated to lateral approach for calcaneal fractures needs an ordered approach. The algorithm presented including propeller perforator flaps proved to be safe and useful.

Introducción: Las fracturas de calcáneo son las fracturas más frecuentes de los huesos del tarso. Diversos estudios han mostrado alta tasa de complicaciones del abordaje que requieren cobertura. El objetivo principal es presentar un nuevo algoritmo de tratamiento para estos defectos de cobertura. Material y Métodos: Entre el 2011 y el 2013 se operaron 95 pacientes con fractura cerrada de calcáneo. Diez pacientes presentaron defectos de cobertura de la herida operatoria. Los defectos se clasificaron en pequeños (< 2 cm), medianos (2-5 cm) y grandes (> 5 cm). Resultados: Se realizaron 11 colgajos en 10 pacientes. Seis pacientes presentaron un defecto pequeño y fueron tratados mediante colgajos locales; cuatro casos de defectos medianos se resolvieron mediante tres colgajos perforantes de arteria peronea de tipo propeller y un colgajo sural. Todos los defectos de la zona dadora, tanto en el colgajo sural como en los colgajos propeller, fueron cerrados de manera primaria sin requerir injertos. Hubo un defecto grande que fue necesario cubrir con un colgajo libre. El período de seguimiento promedio fue 16 meses, con un rango de 5 a 41 meses. En todos los casos se proporcionó una cobertura estable que no requirió revisiones. Conclusiones: Es necesario un enfrentamiento ordenado y protocolizado para resolver estos defectos. En nuestro trabajo, proponemos un algoritmo simple basándonos en el ancho del defecto, incorporando como alternativa el colgajo perforante pediculado tipo propeller para defectos medianos, con el cual se logran coberturas estables y planas, con cierre primario de la zona dadora.

Entrenamiento microquirúrgico básico para realizar un modelo animal de alotrasplante compuesto vascularizado / Basic microsurgical training for a vascularized composite allotransplantation animal model

Introduction: rat hind limb transplantation is a complex animal model of vascularized composite allo-transplantation (VCA). A basic microsurgical training is required prior to the implementation of this model. Aim: to propose a training program for the acquisition of basic skills to perform a microsurgical VCA model. Animals and Methods: the training program was conducted in two stages. First, at the dry lab, basic suturing skills with 9-0 to 11-0 nylon sutures were practiced, reproduced from surgical videos performed by experts. In a second stage, at the wet lab using 13 Lewis rats, 6 hind limb microsurgical dissections were performed and the important steps for transplantation were identified: 10 end to end femoral artery anastomoses with 10-0 nylon interrupted suture; 10 end to end femoral vein anastomoses with 10-0 nylon suture; 3 femoral vein interposition in the femoral artery; 6 end to end sciatic nerve neurorrhaphy; 4 femur osteosynthesis with 21g needle and wire cerclage. Anastomotic patency rate and anastomotic surgical time were recorded. Results: arterial and venous patency rate was 100 and 90 percent respectively. Surgical time decreased from 49 to 24 minutes on arterial anastomoses and from 55 to 25 minutes on venous anastomoses after completion of the training program. When a vein interposition was performed, an immediate patency rate of 100 percent was obtained. Conclusion: a successful staged training model of basic microsurgical skills was performed, in order to perform a VCA model.

Introducción: el trasplante de extremidad posterior de la rata es un modelo microquirúrgico de alotras-plante compuesto vascularizado (ACV), que requiere para su implementación de un entrenamiento microquirúrgico básico sistematizado. Objetivo: comunicar un modelo de entrenamiento microquirúrgico básico para adquirir las habilidades y destrezas que permitan realizar un modelo microquirúrgico de ACV Animales y Métodos: el entrenamiento se realizó en 2 etapas: la primera, en laboratorio en seco. A partir de vídeos de microcirugía, se practicó las destrezas para maniobrar suturas de nylon de 9-0 a 11-0. En la segunda etapa in vivo con animales, (13 ratas Lewis), se realizaron: 6 disecciones microquirúrgicas de extremidad posterior para reconocimiento de estructuras anatómicas; 10 anastomosis término-terminal (T-T) de arteria femoral con sutura interrumpida 10-0; 10 anastomosis T-T de vena femoral; 3 interposiciones de vena femoral en arteria femoral; 6 neurorrafias T-T de nervio ciático; 4 fijaciones óseas de fémur con aguja 21 g y cerclaje con alambre. Se evaluó la permeabilidad de las anastomosis y los tiempos quirúrgicos. Resultados: anastomosis arteriales: la permeabilidad inmediata fue de un 100 por ciento. Los tiempos de anastomosis disminuyeron de 49 a 24 min con el entrenamiento. Anastomosis venosas: la permeabilidad inmediata fue de un 90 por ciento. Los tiempos de anastomosis disminuyeron paulatinamente de 55 a 25 min. Interposiciones venosas: se logró una permeabilidad de 100 por ciento. Conclusión: una estrategia de entrenamiento por etapas, es una forma factible de entrenamiento en microcirugía. Este entrenamiento permite obtener una aceptable permeabilidad anastomótica, paso crítico para realizar modelos de ACV.

Empiema pleural causado por tricomonas: caso clínico / Pleural empyema caused by trichomonas: case report

Pleural empyema formation is one of the potential complications of lower respiratory tract infections and it is characterized by bacterial organisms seen on gram stain or the aspiration of pus on thoracentesis. Very rarely empyema can be caused by trichomonas species, of which Trichomonas Tenax appears to be the most common cause. In this article we report the case of a 51-year-old man who developed a pleural empyema caused by trichomonas, and review the available literature of this rare infection of unknown incidence and uncertain pathogenetic significance. Our patient was treated with metronidazole, however complete cure was not achieved and pulmonary decortication was necessary for the successful outcome. As far as we know, this is the first case of pleural empyema caused by trichomonas reported in Chile.

La formación de un empiema pleural es una de las potenciales complicaciones de las infecciones de la vía aérea inferior, y se caracteriza por la observación de bacterias en la tinción de Gram, o la aspiración de pus en la toracocentesis. Muy infrecuentemente el empiema puede ser causado por alguna de las especies de tricomonas, de las cuales Trichomonas Tenax parece ser la causa más común. En este artículo, reportamos el caso de un hombre de 51 años que desarrolló un empiema pleural causado por tricomonas, y revisamos la literatura disponible de esta rara infección, de incidencia desconocida, y significancia patogénica incierta. Nuestro paciente fue tratado con metronidazol, observándose sólo una respuesta parcial, necesitándose decorticación pulmonar para una recuperación completa. Hasta donde sabemos, este es el primer caso de empiema pleural causado por tricomonas reportado en Chile.

Magnitud del enfisema inducido por elastasa: posible relación con el tipo de daño agudo pulmonar / Elastase induced emphysema: possible relationship with the type of acute lung injury

Introduction: Intratracheal instillation of elastase induces diffuse alveolar damage and emphysema development. However, the Syrian Golden hamster develops more severe emphysema than the Sprague-Dawley rat. Although it is known that early events after elastase instillation determine the magnitude of emphysema development, it is not known if there are species differences in the initial pattern of lung response to elastase. Objective: To evaluate whether rats and hamster differ in the early lung response to elastase, using biochemical markers of acute lung injury. Results: Whereas the rat shows a large increase in alveolar-capillary permeability and few hemorrhagic changes, the hamster shows significant amount of hemorrhage and a small increase in alveolar capillary permeability. Conclusions: There are differences between rats and hamsters in the initial lung response to elastase that could influence the magnitude of emphysema development.

Introducción: El modelo de instilación intratraqueal de elastasa induce daño alveolar difuso y destrucción de la matriz extracelular con desarrollo de enfisema. Sin embargo, el hámster Syrian Golden desarrolla enfisema más severo que el de la rata Sprague-Dawley. Si bien se sabe que los eventos tempranos después de la instilación de elastasa determinan la magnitud del enfisema, se desconoce si existen diferencias entre especies en la respuesta pulmonar temprana. Objetivo: Evaluar si existen diferencias entre ratas y hamsters en la respuesta pulmonar inicial después de la elastasa, mediante el uso de marcadores bioquímicos de daño pulmonar agudo. Resultados: Mientras la rata experimenta un gran aumento de permeabilidad alvéolo-capilar y pocos fenómenos hemorrágicos, el hamster presenta abundante hemorragia y escaso aumento de la permeabilidad. Conclusiones: Existen diferencias entre ratas y hamsters en la respuesta pulmonar inicial frente a la elastasa, que podrían tener relación con las diferencias en magnitud del enfisema.

Instilación intratraqueal de elastasa en la rata: cambios electroforéticos de la alfa1-AT-antitripsina en el lavado broncoalveolar / Intratracheal instillation of elastase in the rat: electrophoretical changes of alphal-antitrypsin in bronchoalveolar lavage fluid

Introduction: Endogenous alphal-antitrypsin alpha is the main inhibitor of the intratracheally instilled elastase in experimental animals. Objective: To evaluate by electrophoresis and immunodetection using western blot analysis, the different forms of alpha1-AT in bronchoalveolar lavage fluid (BALF) of Sprague Dawley rats after intratracheal instillation of elastase, with the hypothesis that the previously observed increment in antielastase activity is due to high levels of active alpha1-AT. Results: In the first hours after elastase instillation the concentration of alpha1-AT increases more than seven times due to an increase in alveolar-capillary permeability. Alpha 1-AT in BAIF is found as the native protein (~ 52 kDa), as complexes of different molecular sizes (> 75 kDa and > 100 kDa) and as a proteolytic product (< 40 kDa). Conclusion: In spite of a high proportion of alpha1-AT in the inactive form as part of different complexes, the increase in alveolar-capillary permeability after elastase treatment contributes to maintain high levels of active alpha. These results could be of importance in other inflammatory lung processes.

Introducción: la antiproteasa alfa 1-antitripsina alfa constituye el principal inhibidor endógeno de la elastasa instilada por vía intratraqueal en modelos experimentales. Objetivo: Evaluar mediante electroforesis e inmunodetección por western blot, las distintas formas en que se encuentra la alfa1-AT en el lavado broncoalveolar (IBA) de ratas Sprague Dawley después de la instilación de elastasa, con la hipótesis de que el aumento en la actividad antielastasa previamente encontrada se acompaña de niveles altos de alfa1-AT activa. Resultados: En las primeras horas post-elastasa la concentración de alfa1-AT en el IBA aumenta más de 7 veces, debido al aumento de la permeabilidad alvéolo-capilar, encontrándose tanto como proteína nativa (~ 52 kDa), como parte de complejos de mayor tamaño (> 75 kDa y > 100 kDa) y como producto de proteólisis (< 40 kDa). Conclusión: A pesar de existir una alta proporción de alfa1-AT inactiva formando complejos, el aumento de la permeabilidad alvéolo-capilar contribuye a mantener niveles altos de alfa1-AT activa. Estos resultados podrían ser extrapolables a distintos procesos inflamatorios pulmonares.

Mixoma cardiaco: Caracterización clínica, métodos diagnósticos y resultados alejados del tratamiento quirúrgico durante tres décadas de experiencia / Cardiac myxoma: Clinical characterization, diagnostic methods and late surgical results

Background: Cardiac myxoma is the most common primary cardiac tumor. Aim: To evaluate clinical aspects, diagnostic methods and surgical outcomes in patients with cardiac myxoma. Patients and Methods: AH patients who underwent surgical resection of a cardiac myxoma between January 1973 and December 2004 at our institution, were identified and their medical records and diagnostic data reviewed. Results: Thirty seven patients identified (24 women), with a median age of 54 years (range 2-74). The most common symptom was dyspnea (51 percent), followed by embolism (24 percent) and cardiac murmurs (16 percent). The diagnosis was made by echocardiogram in 84 percent of patients. The mean tumor size was 4.9 ± 1.3 cm. The tumor was located in the ¡eft atrium in 83 percent of the patients, right atrium in 8 percent and ¡eft ventricle in 3 percent. Two patients had multiple tumors. Surgical approach was transeptal in 51 percent, left atriotomy in 22 percent, combined transeptal and roof of the left atrium in 19 percent and right atriotomy in 8 percent. The tumor and its attachment base were excised in one piece. There were two operative deaths and five late deaths. The mean follow-up was 11.5 years. The 5, 10, 15 and 20 years survival was 89 percent, 83 percent, 75 percent and 64 percent, respectively. Two patients had recurrence (5.4 percent), at 2 and 25years after surgery, respectively, and the recurrence free survival at 10 and 25years was 97 percent and 73 percent, respectively. Conclusions: Dyspnea was the most common symptom and echocardiogram the main diagnostic method. Surgical treatment was highly effective, with low mortality and recurrence rate, with good long term survival.